El acto de lectura y defensa de la Tesis Doctoral titulada “Desarrollo de metodologías avanzadas para la caracterización cuantitativa de proteínas y fosfoproteínas” dirigida por los Dres. Jorge Ruiz Encinar y Ana B. Soldado Cabezuelo, en el marco el Programa de Doctorado en Análisis Químico, Bioquímico y Estructural y Modelización Computacional, tendrá lugar el martes 11 de marzo a las 11:00 h en la Sala de Grados de la Facultad de Química.
RESUMEN
El desarrollo de metodologías analíticas basadas en la espectrometría de masas ha supuesto un avance fundamental en las últimas décadas para la cuantificación y caracterización de proteínas en sistemas biológicos complejos. Sin embargo, la naturaleza inherentemente no cuantitativa de la espectrometría de masas molecular ha supuesto un reto importante en la búsqueda de procedimientos sencillos, exactos y reproducibles que condujeran a la cuantificación absoluta de proteínas. Por ello se plantea en esta Tesis con el objetivo principal desarrollar nuevas metodologías analíticas que permitan avanzar en la identificación, y sobre todo en la cuantificación absoluta sin necesidad de patrones específicos, de proteínas y fosfoproteínas presentes en muestras complejas.
Se ha validado la capacidad de la Cromatografía de líquidos capilar acoplada a ICP-MS/MS para cuantificar de manera absoluta proteínas de venenos de serpiente (Waterinnesia aegyptias-Egipto y Arabia Saudí y una Waterinnesia Morgani-Turquía) utilizando un único patrón de azufre (S).
Se ha desarrollado una metodología analítica para determinar experimentalmente los coeficientes de absortividad (ε) de las especies proteicas en muestras de venenos de serpientes. Para ello, se ha propuesto la detección en línea Visible Ultravioleta (Vis/UV) e ICP-MS/MS a flujos capilares.
Se ha evalúado la capacidad de preconcentración selectiva que poseen nanopartículas funcionalizadas (IMAC) con diferentes metales, para la preconcentración de fosfopéptidos obtenidos mediante digestión tríptica de la α-caseína.
